苯乙烯和吲哚单加氧酶（SMO和IMO）是由烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）依赖的黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）还原酶（StyB或IndB）和单加氧酶（StyA或IndA）组成的两组分黄素单加氧酶。后者使用还原的FAD活化氧并在释放水的同时为基材氧化。我们通过使用NAD（P）H-模拟的1-苄基-1,4-二氢烟碱酰胺（BNAH）直接添加FAD来解决溶液中对还原酶的需求，从而不需要NADH。在此，我们报道了迄今未知的耐油性双歧杆菌DSM15620（Gn IndA）吲哚单加氧酶和来自Gordonia rubripertincta CWB2（Gr）的苯乙烯单加氧酶的耐溶剂性StyA）。在有机助溶剂的存在下，这些酶被证明可以转化庞大且相当疏水的苯乙烯衍生物。随后，就所用助溶剂及其浓度以及FAD和BNAH浓度进一步优化了BNAH驱动的生物转化。我们在本文中证明，Gn IndA和Gr StyA 在有机溶剂（例如四氢呋喃，乙腈或几种醇）的存在下能够实现烯丙基双键（高达217 mU mg -1）的选择性环氧化。值得注意的是，Gn发现IndA可以抵抗高达25％（体积）的甲醇浓度。此外，确定了两种酶的不同的底物偏好，使得它们的独特用途非常有趣。总的来说，我们的结果似乎对许多IMO都具有代表性，这已得到计算机诱变学研究的证实。